超微量分光光度計的使用步驟及注意細(xì)節(jié)都給您了
更新時間:2020-09-25 點擊次數(shù):1905次
超微量分光光度計的使用步驟及注意細(xì)節(jié)都給您了
超微量分光光度計除了常規(guī)的核酸蛋白定量以外,儀器還支持連續(xù)波長掃描,動力學(xué)分析,多波長測量和比率分析,CyDye標(biāo)記的核酸探針定量,標(biāo)準(zhǔn)曲線制作等檢測模式。并且該光度計清潔起來也非常方便,沒有繁瑣的比色皿清潔步驟,只需輕輕一擦,即可進行下一個樣品檢測。
本產(chǎn)品除了常規(guī)的核酸蛋白定量以外,儀器還支持連續(xù)波長掃描,動力學(xué)分析,多波長測量和比率分析,CyDye標(biāo)記的核酸探針定量,標(biāo)準(zhǔn)曲線制作等檢測模式。
超微量分光光度計的使用詳細(xì)步驟如下:
1、以移液槍吸取樣品(0.3~2?L)滴加到檢測平臺上,放下取樣臂。
2、或打開暗室,放入比色皿。
3、點擊軟件界面上的“Measure”按鈕,即可得出樣品參數(shù)(吸光度和濃度)和圖表。
4、用干凈的吸水紙擦去上下檢測平臺上的樣品。
5、如需保存圖表,可點擊“Save Graph”按鈕。
6、待全部樣品測定結(jié)束后,點擊“Show Report”按鈕,已測樣品的測定數(shù)據(jù)將出現(xiàn)在Excel表格中。
超微量分光光度計在使用時應(yīng)注意下面這些事項:
1、樣品混合要充分,否則吸光值太低,甚至出現(xiàn)負(fù)值;混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,否則讀數(shù)漂移劇烈。樣品混合不均勻會直接導(dǎo)致檢測不確定,重復(fù)性低。
2、濃度接近2ng/μl濃度的樣品可能會導(dǎo)致不可靠的260/280和/或260/230的比值。
3、樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素,由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會干擾測試效果。樣品的濃度不能過低,或者過高(超過光度計的測試范圍)。
4、A260/A280、A260/A230比值受溶液酸堿度及離子強度的影響,如酸溶液會使A260/A280比值降低,低離子強度和低 pH 溶液會增加 280 nm 處的光吸收值。因此必須確??瞻讬z測和溶解樣品所用Buffer的離子濃度和pH值一致。
5、樣品檢測上樣量不能太少,必須能夠保證能后連接上下兩根光纖形成光柱,從而使得檢測正常進行。
6、樣品臺清潔,在檢測前,檢測后以及連續(xù)使用儀器30分鐘后均需要對上下接觸樣品的部位用雙蒸水或純水擦拭。
7、切忌不可用噴壺在樣品臺上噴射,以防液體液體進入儀器內(nèi)部造成損壞。
8、切忌不可用洗滌劑或異丙醇清潔基座。
9、儀器放置位置應(yīng)當(dāng)遠離通風(fēng)口,以免液滴蒸發(fā)太快導(dǎo)致濃度讀數(shù)偏大。